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K1622逆转录酶的原理介绍
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    有些K1622逆转录酶还有DNA内切酶活性,这可能与病毒基因整合到宿主细胞染色体DNA中有关██。反转录酶的发现对于遗传工程技术起了很大的推动作用,目前它已成为一种重要的工具酶██。用组织细胞提取mRNA并以它为模板,在反转录酶的作用下,合成出互补的DNA,由此可构建出cDNA文库,从中筛选特异的目的基因,这是在基因工程技术中zui常用的获得目的基因的方法██。本酶是通过点突变使RNaseH活性缺失,所以它具有的DNA聚合酶的活性与野生型相同,同时其延伸能力也有显著提高██。逆转录酶一个活性单位定义为在37℃,10min条件下,使1nmol的脱氧核糖核酸掺入酸性沉淀物质所需的酶量██。
 
    M-MLV反转录酶比AMV反转录酶缺乏连续性,因此要获得像AMV反转录酶反应中产生同样量的cDNA就要求使用较多单位的M-MLV反转录酶██。用1微克的mRNA起始合成*条链的cDNA,要用8单位的M-MLV反转录酶才相当于1单位的AMV反转录酶的作用██。通常情况下,细胞内的转录映由DNA到RNA的,所得RNA为信使RNA供蛋白质合成作模板用██。而在部分RNA病毒中,要实现自身扩增,必须具有DNA,因此先由RNA逆转录合成cDNA再由cDNA转录出RNA██。K1622逆转录酶可用RT—PCR,将RNA转变为DNA后扩增,以获得RNA的序列██。
 
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021-65672052
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